Virus Variola: zlo za dobro

Virus Variola: zlo za dobro

Sergej Šhelkunov
"Science first hand" št. 3 (51), 2013

Človek, tako kot druge živali, se je moral nenehno boriti s patogenim mikroorganizmom, ki ga obkrožajo, kar je pripeljalo do nastanka in razvoja v naših sistemih prirojene in pridobljene imunitete. Vendar pa nepravilnosti pri urejanju teh mehanizmov, ki ščitijo pred zunanjimi "agresorji", vodijo k razvoju kroničnih vnetnih in avtoimunskih bolezni, ki jih je težko zdraviti.

Za zdravljenje bolezni, kot so astma, ateroskleroza, sistemski eritematozni lupus, psoriaza, revmatoidni artritis, multipla skleroza in druge, kot je vir virusa variola, se uporabljajo ljudska protitelesa, ki zavirajo vnetne dejavnike proteinov. Izkazalo se je, da je za te namene mogoče uporabiti proteine ​​nalezljivih mikroorganizmov, ki so evolucijsko prilagojeni, da premagajo zaščitne sisteme telesa.

Posebno zanimanje za medicinsko biotehnologijo so visoko patogeni virusi, za katere je človek edini gostitelj. In danes, na osnovi beljakovin virusa variola, ki je bila stoletja nadloga civilizacij,se pripravljajo na popravljanje najtežjih patoloških stanj neinfekcijskih, vključno z avtoimunskim, naravo.

O avtorju

Sergej Nikolaevič Schelkunov – doktor bioloških znanosti, akademik Ruske akademije za naravoslovje, vodja oddelka za genomske raziskave in razvoj metod diagnostike DNA za poxviruse v Centru za vektorski raziskovalni center Virologije in biotehnologije (Koltsovo, Novosibirska regija), profesor na Oddelku za molekularno biologijo, Novosibirskska državna univerza Nagrajenec ruske vlade (2005). Avtor in soavtor več kot 200 znanstvenih publikacij.

Do odkritja Antonija van Leeuwenhoeka v XVII. Stoletju. človeštvo sploh ni sumilo, da živi v okolju, napolnjenem z mnogimi različnimi majhnimi bitji. Ti mikroorganizmi so tako majhni, da jih je mogoče videti le oborožen z dobrim mikroskopom: optičnim mikroskopom za proučevanje bakterij in drugih enoceličnih, zapletenega in dragega elektronskega za pridobivanje »portretov« virusa.

Večina mikroorganizmov sočasno z ljudmi in živalmi mirno miruje in veliko – na načelih obojestransko koristnih, nekateri pa kršijo "mirovno pogodbo", ki prehaja v kategorijo patogenov.Presenetljivo je, da lahko v naši korist izkoristimo sposobnost takšnih patogenih mikroorganizmov za premagovanje zaščitnih sistemov gostiteljskega organizma. Posebno zanimanje za sodobno medicinsko biotehnologijo so visoko patogeni virusi, kot je virus variola, za katerega je človek edini gostitelj. Na osnovi beljakovin teh virusov danes se ustvarjajo zdravila za zdravljenje hudih kroničnih vnetnih bolezni neinfekcijskih, vključno z avtoimunskim, naravo.

Mikroorganizmi živijo povsod: v zraku in v vodi, v tleh in v lastnih telesih … V primerjavi z ljudmi in živalmi se množijo zelo hitro in njihove skupnosti so neizmerno večje. Torej, če se človeštvo prenese na lestvico microworld, bi se vse 7 milijard ljudi zlahka prilegalo v standardno mikrobiološko bučko.

Da bi preživel, se je človek, tako kot druge živali, stalno boril s patogeni, ki so ga obkrožali. Takšni dogodki v evolucijski zgodovini so se zgodili večkrat in to je razlog za nastanek in razvoj sesalcev velikega števila zaščitnih mehanizmov,zagotavljanje njihovega preživetja v "mikrobni bujici" tankega sloja biosfere našega planeta.

Med zaščitnimi reakcijami telesa je najbolj "hitro" – nespecifičnot.j. proti katerim koli virusom, mikrobom in biološkim makromolekulam. Gre za sistem prirojena imunostkonfigurirani tako, da prepoznajo in se nato odzovejo na molekularne sestavine mikroorganizmov, ki predstavljajo nevarnost. Pomembno vlogo pri zgodnji nespecifični obrambi telesa pred okužbo igrajo dobro znani vnetni procesi, ki preprečujejo širjenje patogena v prvih urah in dneh po okužbi.

Posebna zaščita telesa pred določenim povzročiteljem okužbe – prilagodljiv ali pridobljena imunitetaRazvija se počasneje in je zapletena interakcija različnih vrst imunskih celic, ki jih regulirajo posebni proteini.

Imunska zaščita

Naloga imunskega sistema telesa je zaščititi pred zunanjimi in notranjimi grožnjami.

Inkajte imuniteto Ni specifično – zagotavlja zaščito pred vsemi nalezljivimi zdravili: virusi, bakterijami in tudi makromolekulami.

Ena od prvih (in morda ena najstarejših) vrst takšne nespecifične zaščite je apoptoza – programabilne samomorilne celice. V primeru virusne okužbe apoptoza, ki nastane kot posledica molekularnega prepoznavanja specifičnih patogenih molekul, preprečuje razmnoževanje virusa in okužbo drugih celic gostiteljskega organizma.

Pomembna vloga zgodnje nespecifične zaščite telesa pred virusno infekcijo vnetjeki se pojavi v prvih urah in dneh po okužbi in je namenjen omejevanju širjenja virusa. Celice prirojenega imunskega sistema sesalcev – makrofagov, dendritičnih celic in naravnih morilcev, kot odziv na okužbo, proizvajajo tako imenovane proinflamatorni citokini, kot so interleukin-1β (IL-1β), interlevkin-18 (IL-18), faktor tumorske nekroze (TNF) in gama-interferon (γ-IFN). Razvoj vnetne reakcije vključuje proteine ​​in drugo skupino – kemokiniki uravnavajo gibanje in delovanje levkocitov.

Dodatni mehanizmi prirojene imunosti vključujejo dopolnilo – multikomponentni niz kompleksnih serumskih proteinov, ki so proteolitični encimi, vključeni v inaktivacijo infekcijskih sredstev in okuženih celic.

Posebna zaščita telesa pred določenim povzročiteljem okužbe – prilagodljiv ali pridobljena imuniteta, se razvije počasneje kot reakcije prirojene imunosti. Izvaja se kot rezultat kompleksne interakcije celic drugačnega tipa, ki jih nadzirajo citokini TNF, IL-1β in γ-IFN. Njegov rezultat je pojav B-limfocitov, ki sintetizirajo specifična protivirusna protitelesa in virusno specifične citolitične T-limfocite. Specifična protitelesa lahko komunicirajo z virusnimi delci in njihovimi komponentami posamično ali v kombinaciji s komplementom, inaktivirajo jih.

Tako so interleukin-1β, faktor tumorske nekroze in gama-interferon najpomembnejši citokini, ki skupaj z regulacijo vnetnih reakcij nadzirajo razvoj adaptivnega imunskega odziva organizma na okužbo.

Vsi ti sistemi nas ščitijo pred zunanjimi "agresorji", vendar lahko kršitve v njihovem delu vodijo k razvoju patoloških stanj, ki jih spremljajo kronične vnetne in (ali) avtoimunske reakcije, kot so astma, ateroskleroza, sistemski eritematozni lupus, psoriaza, revmatoidni artritis, multipla skleroza in druge hude bolezni, ki jih je težko zdraviti.

Trenutno se razvijajo metode za tako imenovano "biološko" terapijo takšnih bolezni, ki temelji na blokiranju pretirane aktivacije obrambnih sistemov s pomočjo različnih bioloških makromolekul. To vključuje uporabo človeških protiteles, ki lahko specifično interakcijo in deaktivacijo beljakovin prirojenih in prilagodljivih imunskih sistemov, katerih prekomerna sinteza vodi v razvoj patologij.

Kaj pa, če uporabimo za ta namen proteine ​​patogenih mikroorganizmov, kot so virusi, evolucijsko prilagojeni, da premagajo zaščitne sisteme telesa, obrnil, figurativno govoreč, zlo za dobro?

Patogen in antroponotik

Kraljestvo virusov je pred več kot sto leti odkril izjemen ruski znanstvenik DI Ivanovsky, vendar je bilo mogoče v zadnjih desetletjih študirati te najmanjše organizme, zahvaljujoč hitremu razvoju instrumentalnih metod raziskovanja.

Čeprav so v organizaciji in delovanju virusi zelo raznoliki, se lahko vsi pomnožijo le v celicah drugih organizmov, enoceličnih in večceličnih. V procesu dolgotrajnega skupnega razvoja z gostiteljskim organizmom virusi nenehno "poskušajo" nove različice.zatiranje gostiteljskih obrambnih reakcij ali "goljufanje" zaradi molekularne mimikrije. Zlasti virusi lahko vključijo v svoje genomske kodirne sekvence celičnih genov, vključenih v regulacijo imunskih odzivov, in jih spreminjajo ter jih prilagajajo, da zagotovijo svojo vitalno aktivnost.

Različni virusi sesalcev se razlikujejo ne samo glede velikosti genomov in samih virusnih delcev, temveč tudi v njihovih razvojnih strategijah v gostiteljskem organizmu. Virusi različnih družin kažejo neverjetno raznolikost mehanizmov za premagovanje sistemov prirojene in prilagodljive imunitete sesalcev. Zato študija teh lastnosti virusov vam omogoča, da ugotovite nove vzorce organizacije in delovanja zaščitnih sistemov živali in ljudi, ki omogočajo ozdravitev po okužbi s patogenim sredstvom.

Večina virusov lahko okuži široko paleto živalskih vrst (krog gostitelja). Vendar pa je za medicinsko biotehnologijo visoko patogeno in antroponot viruse, za katere je človek edini lastnik.V tem primeru lahko virus zelo učinkovito zatira (ali "pobegne" iz napada) imunski odziv človeškega telesa. Genotipske študije takih virusov in identifikacija virusnih beljakovin, ki učinkovito zavirajo razvoj vnetnih procesov kot odziv na okužbo, ustvarjajo predpogoje za oblikovanje novih zdravil za zdravljenje kroničnih vnetnih bolezni neinfektivne narave.

Neverjeten primer visoke patogenosti za ljudi in stroga antroponoza je virusa variola. Ta virus je verjetno imel na začetku široko paleto gostiteljev, vendar je v procesu evolucije izgubil zmožnost razmnoževanja v telesu drugih sesalcev, pri čemer je ostal endemično (t.j., značilno samo za to območje) že več stoletij na gosto poseljenih območjih, predvsem indijskega podcelina (Schelkunov, 2012).

Poxvirusi, ki jim pripada virus črne koze, so največji virusi, ki vsebujejo sesalce. Virusni proteini z imunomodulatorno aktivnostjo se sintetizirajo v zgodnjih fazah virusne okužbe.Ostajajo v okuženi celici ali jo zapustijo, in vzajemno delujejo s ključnimi regulatornimi proteini tako prirojene kot prilagodljive imunosti organizma gostitelja. Z zatiranjem aktivnosti teh proteinov virus okuženi celici dobi s krožno obrambo pred napadi imunskega sistema gostitelja. Celične celice fibroblasti zdravo človeško pljučno tkivo, okuženo z virusom variola (seva Indija-1967). Elektronska mikroskopija. Fotografija E. Ryabchikova

Hkrati virus virusov črnih koz ni sposoben biti v človeškem telesu v latentnem stanju ali povzročil kronične okužbe – bolezen se vedno konča z okrevanjem ali smrtjo okužene osebe. To zmanjšuje verjetnost, da virus preživi v naravi in ​​kaže, da je padel v neke vrste evolucijski "slepi konec"; po drugi strani pa se je gensko spremenjena vrsta od roda do množice na molekularni ravni maksimalno prilagajala množični mehanizmi prirojene in prilagodljive človeške imunitete (Schelkunov, 2011).

Takšne lastnosti zelo nevarnega virusa variola so predlagale, da se njegovi proteini lahko uporabljajo za zdravljenje različnih človeških imunopatologij (Schelkunov, 1995).In danes, v Državnem raziskovalnem centru Virologije in biotehnologije "Vector" (Koltsovo, Novosibirska regija), potekajo dela za ustvarjanje drog nove generacije na osnovi beljakovin, ki jih izločajo virusi po-virusov, v katere spada virus majhen pastor.

Osebje državnega raziskovalnega središča virologije in biotehnologije "Vector" (Koltsovo, Novosibirska regija) je bilo prvo na svetu, ki je razlagalo strukture genomov patogenih za človeške viruse velikih koz, koz krav in opic, izoliranih od bolnih ljudi (Shchelkunov et al., 1993, 1998, 2001) . Primerjava genomskih strategij teh virusov in genov, ki kodirajo imunomodulatorne proteine, je pokazala, da so vsi virusi, ki spadajo v družino poksvirusa (Poxviridae), so značilni najrazličnejši mehanizmi za premagovanje zaščitnih imunskih odzivov človeškega telesa v primerjavi z virusi drugih družin (Shchelkunov, 2012). Virus variola, ki je edini gostitelj človeškega bitja, je najučinkovitejši v primerjavi z drugimi virusi pox in zavira aktivnost človeškega imunskega sistema.

Orožje proti vnetjem

Kot smo že omenili, je glavni vzrok avtoimunskih bolezni neravnovesje imunitete,vključno s prekomerno sintezo snovi, ki povzročajo vnetne reakcije.

Eden od ključnih citokinov imunskega vnetnega odgovora je faktor tumorske nekroze (TNF) – to je njegova povečana produkcija, ki vodi do bolezni avtoimunske narave, kot so luskavica, Crohnova bolezen, revmatoidni artritis itd. Visoka raven produkcije TNF povzroča hudo patologijo, pogosto s smrtnim izidom, – septični ali endotoksični šok.

Z vezavo TNF na njegove proteinske receptorje, fiksirane na celične membrane, je možno zavirati z uporabo ustreznih monoklonskih protiteles ali tako imenovanih topnih oblik njegovih receptorjev, ki so zunajcelične domene (regij) receptorskih proteinov in so običajno prisotne v serumu in drugih bioloških tekočinah. Dodajanje teh molekul TNF mora inaktirati ta citokin in zmanjšati vnetni proces, ki ga povzroča.

Dejansko je bil v modelnih laboratorijskih poskusih dokazan terapevtski učinek protiteles proti TNF pri zdravljenju številnih patologij, ki jih povzroča povečana produkcija TNF.Vendar poskusi uporabe neposredno topnih celičnih receptorjev TNF za te namene niso dali pozitivnih rezultatov. Uspeh je bil dosežen le s pomočjo metod genskega inženiringa, ko so nastali ti hiperenski proteini, ki jih sestavljajo TNF-vezavni del celičnih receptorjev in fragment človeškega imunoglobulina.

Že več let je več takšnih bioloških terapevtskih sredstev na osnovi človeških beljakovin uspešno uporabljenih v klinični praksi za zdravljenje neinfekcijskih vnetnih bolezni. To je, prvič, Etanercept (na osnovi kimernih beljakovin) in Infliximab in Adalimumab (na osnovi monoklonskih človeških protiteles); V zadnjem času je bil ta seznam dopolnjen z dvema podobnima zdraviloma.

Za zdravljenje avtoimunskih bolezni nastanejo tako imenovani biološki terapevtski agenti proti pro-vnetnim citokinam, kot je faktor tumorske nekroze (TNF). Na primer Infliximab inAdalimumabki temelji na humanih monoklonskih protitelesih; Etanercept – Himerični protein, ki sestoji iz TNF-vezavnega dela celičnih receptorjev in fragmenta humane imunoglobulina.Ta zdravila so odobrena za zdravljenje revmatoidnega artritisa, psoriaze in psoriatičnega artritisa, kot tudi Crohnove bolezni in ulceroznega kolitisa. Priprave s podobnim učinkom lahko ustvarimo tudi na osnovi CrmB, proteina virusa variola, ki se lahko veže na faktor človeške tumorske nekroze (a). Trije virusni proteinski molekuli se vežejo na eno homotrimerno molekulo faktorja tumorske nekroze (bpogled od zgoraj)

Vendar so klinične študije pokazale, da so bolniki z revmatoidnim artritisom ali drugo vnetno ali avtoimunsko boleznijo selektivno občutljivi samo na eno od teh zdravil proti TNF. Poleg tega, ker so vsa ta zdravila beljakovinske narave, so sami tarča za imunski sistem bolnikov, zato se lahko z dolgoročno terapijo njihova učinkovitost zmanjša. To pomeni, da če izgubite občutljivost za eno drogo, jo morate zamenjati z drugo.

In tukaj lahko nova zdravila, ki temeljijo na virusnih beljakovinah, pomagajo pri terapevtih. Na primer, pripravki proti TNF na osnovi poksvirusa TNF-vezavnih beljakovin se že razvijajo v VC Vector Vector SSC.

Učinkovitost TNF-vezavnega proteina virusa variola pri zdravljenju septičnega šoka je bila testirana na laboratorijskih miših, ki so jih injicirali z bakterijskim lipopolisaharidom (LPS), komponento bakterijskih sten, kar je povzročilo močan imunski odziv s sproščanjem proinflamatornih citokinov, kar vodi k razvoju nevarnega septičnega šoka. Uvedba virusnih proteinov je znatno povečala preživetje obolelih posameznikov.

Pri tem so nastali rekombinantni baculovirusi z uporabo tehnik genetskega inženiringa, ki lahko v celični kulturi proizvajajo TNF-vezavni protein (CrmB), ki je značilna za kravato, opičje in virusne topne koze. V eksperimentalnem modelu endotoksičnega šoka pa je bilo dokazano, da ima samo CrmB beljakovinski virus pomemben terapevtski učinek (Gileva et al., 2006). Ta proteina ali njene rekonstruirane variante, ki lahko postanejo aktivni princip novih terapij proti TNF (Gileva et al., 2009).

Revmatoidni artritis – Sistemska avtoimunska bolezen veznega tkiva, ki se kaže predvsem s kroničnim vnetjem sklepov: gleženj, gležnje, kolena in roke.

Danes vsak stotinski prebivalec Zemlje trpi zaradi te bolezni, to je več kot 70 milijonov ljudi. Ženske trpijo večkrat pogosteje kot moški. Bolezen se običajno razvije po 30 letih. V 70% primerov revmatoidni artritis vodi do invalidnosti, kar se zgodi zelo zgodaj.

Vzroki te bolezni niso natančno ugotovljeni, vendar je znano, da je spodbuda za njegov razvoj neuspeh v imunskem sistemu zaradi hipotermije, stresa, poškodb sklepov in okužb, vključno z akutnimi okužbami dihal, vneto grlo in gripo. Pri revmatoidnem artritisu je prekomerna sinteza takšnih pro-vnetnih citokinov kot faktorja tumorske nekroze in gama-interferona.

Sepsis (od grške "gnitje") – resna človeška nalezljiva bolezen, ki se razvije kot sistemska vnetna reakcija, ko infektivne snovi vstopijo v kri (bakterije ali enocelične glivice) ali njihovi toksini. Resnost bolezni je pogosto povezana z razvojem ti septičnega šoka (infektivno-toksični šok, endotoksični šok), ki se pogosto razvije med okužbo z gramnegativnimi bakterijami in stafilokoki, spremlja pa ga tudi disfunkcija pljuč, jeter in ledvic ter spremembe v sistemu koagulacije krvi.

Kljub povečanim možnostim moderne protibakterijske in protiglivične terapije je smrtnost za sepso še vedno 25-30%. Danes ta bolezen ostaja eden glavnih vzrokov za smrt: več kot 200 tisoč ljudi umre vsako leto v Združenih državah Amerike.

Zdaj se je izkazalo, da sama okužba ni neposreden vzrok za številne patološke spremembe, značilne za sepso. Najverjetneje se pojavijo zaradi odziva telesa na okužbo in nekaterih drugih dejavnikov, ki jih povzroča delovanje različnih endogenih regulativnih snovi. In če se v normalnem stanju lahko takšne molekulske reakcije štejejo kot reakcije prilagajanja ali prilagajanja, potem se med sepso njihova prekomerna aktivacija poškoduje.

Vodilno vlogo mediatorjev škode v septičnem šoku igra superproduktni faktor tumorske nekroze, gama-interferon in številni interlevkini.

Farmacevtsko "zlato dno"

Zmožnosti medicinske "aplikacije" virusnih beljakovin še zdaleč niso izčrpane s samo terapijo s TNF. Torej je znan vnetni citokin gama interferon (γ-IFN).In trenutno je v drugi fazi kliničnih preskušanj zdravilo. Fontolizumabki temelji na humanih monoklonskih protitelesih proti IFNγ in je namenjena za zdravljenje nekaterih avtoimunskih bolezni.

Vendar pa je IFNγ vezavni protein, ki ga izloča virus variola, lahko tudi učinkovit inhibitor humanega IFNγ. Taka beljakovina, dobljena v Vector VB SSC, je učinkovito zavirala zaščitni učinek humanega gama-interferona po okužbi kulture človeških pljučnih celic človeškega zarodka z virusom mišjega encefalomiokarditisa. V smislu te lastnosti je bil virusni protein bistveno boljši od pripravka, ki temelji na humanih celičnih IFNγ receptorjih. (Nepomnyashchikh et al., 2005).

Na SSC VB Vektor smo pridobili rekombinantni virus variola virusov in se lahko vežejo na humani gama interferon (γ-IFN), katerega izločanje se poveča pri številnih avtoimunskih boleznih. Na sliki: struktura homotetramernega kompleksa viralnega γ-IFN-vezavnega proteina, povezanega z dvema humana γ-IFN homodimera

Danes obstaja veliko dokazov, da vnetni proces in histopatološke spremembe v številnih vnetnih in avtoimunskih boleznih živčnega sistema,artritis, glomerulonefritis, sistemski eritematozni lupus in druge bolezni so v mnogih primerih posledica aktivacije sistema krvno dopolniloki predstavlja drug sistem nespecifične imunosti. Komplement ima pomembno vlogo pri reakciji zavrnitve presadka.

Poksvirusi kodirajo poseben protein (CRP), ki lahko zavira aktivacijo komplementa, in protein istega virusa variola najbolj učinkovito sodeluje z človeškimi komplementnimi proteini. Danes se domneva, da lahko ta specifični virusni protein postane obetavno zdravilo za zdravljenje Alzheimerjeve bolezni, sindroma multiorganove disfunkcije in zavrnitve ksenografta (Jha, Kotwal, 2003). Tako je bilo pri laboratorijskih živalih dokazano, da rekombinantni KSB pomaga obnoviti delovanje možganov po zmerni in hudi travmatični poškodbi možganov. Ta protein je bil učinkovit tudi pri poškodbah hrbtenjače: njegova uporaba je bistveno zmanjšala histopatološke spremembe, ki jih povzročajo vnetne reakcije.

V patogenezi vnetnih in avtoimunskih bolezni igrajo pomembno vlogo in kemokini – Obsežna družina majhnih beljakovin, ki imajo zelo podobno terciarno strukturo. Poksvirus kodira proteine, ki vežejo kemokin, ki nimajo homologov med znanimi vretenčnimi proteini v aminokislinskem zaporedju. Njihov visok terapevtski potencial je bil prikazan v številnih laboratorijskih modelih vnetnih in avtoimunskih bolezni (Nepomnyashchikh, Shchelkunov, 2008).

Zato so znanstveniki vnaprej prepričani, da se virusni proteini, ki so antagonisti beljakovin imunskega regulatorja, uporabljajo za terapevtske namene. Danes se na podlagi njih, z uporabo metod genetskega inženirstva, razvijajo nove generacije zdravil za odpravljanje človeških patoloških stanj, povezanih s prekomerno aktivacijo proteinskih mediatorjev zaščitnih sistemov telesa.

In s tega vidika si lahko ogledamo nov virus virusov velikih koz, ki je smrtonosen za človeka: rezultati laboratorijskih študij in predkliničnih preskušanj kažejo na veliko obljubo zdravil za zdravljenje hudih vnetnih in avtoimunskih bolezni človeka, ustvarjenih na osnovi beljakovin tega virusa nekdanji bug civilizacij.

Avtor in uredniki hvala k. B. n D.V.Antonets (FBUN SSC VB "Vector") za pomoč pri pripravi ilustrativnega gradiva.

To delo je podprla ruska fundacija za temeljne raziskave (donacija 12-04-00110a).

Literatura
1. Nepomnyaschikh, T.S., Shchelkunov, S.N. Imunomodulirajoči beljakovini Poxvirus kot nov način imunocorrekcijske terapije // Molekularni. biologija 2008. T. 42, št. 5. str. 904-912.
2. Schelkunov S. N. Virus variola je vir novih medicinskih pripravkov // Soros Educational Journal. 1995. № 1. S. 28-31.
3. Schelkunov, S. N., Genetsko inženirstvo: učbenik. dodatek. 3. izd., Corr. in dodajte. Novosibirsk: Sib. univerza založba, 2008. 514 str.
4. Shchelkunov, S.N., Premagovanje ortopoksvirusov zaščitnih sistemov sesalskega telesa // Molekularno. biologija 2011. V. 45, No. 1. S. 30-43.
5. Schelkunov S. N. Ospa – meč Damoklov civilizacij // Znanost iz prve roke. 2012. št. 6 (48). Pp 96-109.
6. Shchelkunov S.N. Orthopoxvirus geni, ki posredujejo virulenca in gostiteljski tropizem // Napredek v virologiji. Vol. 2012, člen ID 524743, 17 str. DOI: 10.1155 / 2012/524743.


Like this post? Please share to your friends:
Dodaj odgovor

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: